Vorbereitung der Gärung

Impfkultur

Um mit der Gärung zu beginnen, benötigst du eine Vorkultur mit einer bestimmten Anzahl gesunder Zellen als Impfkultur. Eine Impfkultur, die für die Gärung genutzt wird, sollte folgende Kriterien erfüllen:

• Sie sollte gesund sein und sich in einer aktiven Phase befinden, um die Anlaufphase zu verkürzen.

• Sie sollte frei von Kontamination sein

• Sie sollte eine passende Morphologie aufweisen

• Sie sollte in ausreichender Menge verfügbar sein

• Sie sollte ihre Produktherstellungskapazitäten behalten

Kontamination vermeiden

Eines der schlimmsten Dinge, die während der Gärung passieren können, ist eine Kontamination. Kontaminanten sind ungewollte Mikroorganismen, die mit dem Originalstamm um Nährstoffe konkurrieren und das Experiment stören. Kontaminanten können mikroskopisch, oder aus einem Datensatz detektiert werden. Ein Kontaminant wird oft schnell wachsen und so zu weniger Produkt, sehr hohen CO₂-Konzentrationen und einer hohen Biomasse führen. Es ist extrem wichtig, Kontaminationen zu vermeiden; deshalb muss der Bioreaktor vor dem Beginn der Gärung sterilisiert werden.

Fermenter oder Bioreaktoren können mit oder ohne Medium sterilisiert werden. Bioreaktoren werden normalerweise sterilisiert, indem die Innenseite und die Stäbe mit Dampf erhitzt werden. Für die Sterilisation wird im Reaktor für 20 Minuten ein Dampfdruck von einem Bar erzeugt. Nachdem die Sterilisation abgeschlossen wurde, ist es wichtig, einen positiven Druck im Reaktor aufrechtzuerhalten, ansonsten kann sich ein Vakuum entwickeln und nicht sterile Luft kann in den Reaktor gesogen werden.