HPLC-Prinzipien
Abbildung 1: Komponenten eines HPLC-Geräts
Wie in Abbildung 1 zu sehen ist, wird bei dieser Methode eine Säule verwendet, die mit feinen Kügelchen, die die stationäre Phase bilden und einem Lösungsmittel, das als mobile Phase bekannt ist und sich, wie der Name schon sagt, über die Säule aufgrund des Drucks, der durch die Pumpe erzeugt wird.
Wenn eine Mischung der Analyten A, B und C durch die Säule läuft, werden sie interagieren unterschiedlich mit der stationären Phase, basierend auf ihrer Eigenschaft. Die Analyten, die am wenigsten mit der stationären Phase wechselwirken, bewegen sich am am schnellsten (A). Im Gegensatz dazu bewegen sich die Analyten, die am stärksten mit der stationären Phase wechselwirken, bleiben länger in der Säule (C) und erreichen den Detektor zuletzt.
In der Chromatographie ziehen sich Verbindungen, die sich ähnlich sind, gegenseitig an. Polare polare Verbindungen werden am meisten von sonstigen polaren Verbindungen angezogen und unpolare unpolare Verbindungen werden am meisten von sonstigen unpolaren Verbindungen angezogen.