Reservoir für mobile Phase
Abbildung 1: Reservoir für die mobile Phase, bestehend aus mehreren Glasflaschen mit speziellen Verschlüssen
Die Trennung der Analyten erfolgt aufgrund von Unterschieden in den Wechselwirkungen mit der stationären und mobilen Phase. Die Analyten müssen auch eluiert werden, um das Ende der Säule zu erreichen, wo sie vom Detektor erfasst werden. Dies ist der Zweck der mobilen Phase: Sie transportiert die Verbindungen von der Injektionsstelle zum Detektor.
Mobile Phasen bestehen aus einer Mischung aus Wasser und einem organischen Lösungsmittel oder aus Mischungen organischer Lösungsmittel. Wenn der pH-Wert eingestellt werden muss, werden stattdessen Pufferlösungen verwendet. Dies ist wichtig, wenn die Analyten empfindlich auf Änderungen des pH-Werts reagieren.
Die Lösungsmittel werden in die Reservoirs für die mobile Phase gegeben (siehe Abbildung 1). Das Reservoir besteht aus einer Flasche mit einem speziellen Deckel mit Löchern. In diesen Löchern befindet sich ein Schlauch, der das Reservoir für die mobile Phase mit der Säule verbindet. Die mobile Phase fließt durch diese Schläuche (siehe Abbildung 2), in die Säule und dann in den Abfallbehälter.
Abbildung 2: Filter und Schläuche zum Anschluss des Reservoirs für die mobile Phase an das HPLC-Gerät
Techniken:
Es gibt zwei Trennverfahren, die auf der Zusammensetzung der mobilen Phase während des Experiments beruhen.
- Isokratische Trennung:Die Zusammensetzung der mobilen Phase bleibt während der Laufzeit konstant.
- Gradientenelution: Die Zusammensetzung der mobilen Phase ändert sich mit der Zeit.