mRNA-Aufreinigung mit Magnetbeads
Es gibt verschiedene Methoden, um mRNA aus der Gesamt-RNA in einem Extrakt zu reinigen. Zum Beispiel durch Säulenseparation (ähnlich der DNA-Extraktionsmethode) oder durch Magnetbeads, was weiter unten beschrieben wird.
Die Magnetbeads mit angehängtem Oligo(dT) binden selektiv an die mRNA-Moleküle, da mRNAs in der Regel einen poly-A-Schwanz enthalten. Wenn sie in das Magnetgestell gegeben werden, werden die Beads, die gebundene mRNA enthalten, von der Lösung getrennt. Anschließend können wir die Lösung, die alle unerwünschten Materialien enthält, abpipettieren und die Beads mit 80%igem Ethanol waschen. Nach mehreren Waschvorgängen können wir die mRNA-Moleküle von den Magnetbeads eluieren (trennen) und in ein neues Röhrchen überführen.
Magnetbeads können auch für die Reinigung anderer Moleküle verwendet werden. Unter Reinigung von DNA erfährst du mehr über die Funktionsweise der Magnetbeads.