Reinheit von Nukleinsäure

Die Reinheit der Nukleinsäure kann durch Messung der Absorption bei unterschiedlichen Wellenlängen gemessen werden.

Nukleinsäuren absorbieren Licht bei 260 nm, Proteine absorbieren bei 280 nm, chemische Kontaminanten (wie die organischen Stoffe Phenol und Trizol) absorbieren Licht bei 230 nm. Zusätzlich kann auch die Absorption bei 320 nm gemessen werden, um die Probe auf andere Kontaminanten zu überprüfen.
Aus diesem Grund kannst du ganz einfach die Reinheit der Nukleinsäure durch die Bildung der Verhältnisse 260/280 nm, 260/230 nm und 260/320 nm bestimmen.

Jedes Verhältnis hat einen bestimmten Wert, der die Probenreinheit beschreibt:
- Für 260/280 wird ein Verhältnis von ungefähr 1,8 als pure DNA akzeptiert. Für die RNA sollte das Verhältnis größer sein, ungefähr bei 2.
- Für 260/230 weist ein Verhältnis von größer als 1,8 auf reine Nukleinsäure hin.
- Für 260/320 weist ein Verhältnis von 1,8-2,2 auf reine Nukleinsäure hin.