Tubulus Reabsorption Experiment
Das Ziel dieses Experiments ist es, das Volumen der Flüssigkeit zu messen, die während des Filtrationsprozesses in der Niere durch die epithelialen Wände des Nierentubulus rückresorbiert wird.
Das Prinzip besteht darin, das Röhrchen an einem Ende mit einer Kochsalzlösung zu perfundieren und das daraus resultierende Volumen am anderen Ende zu messen. Die Volumendifferenz gibt Aufschluss darüber, ob das Perfusat auf dem Weg durch den Tubulus an Volumen gewonnen oder verloren hat. Im Experiment würde das verlorene Volumen in die Badesalzlösung gehen, die den Tubulus umgibt, aber im wirklichen Leben würde es zurück in den Körper absorbiert werden.
Mit Hilfe von Mikromanipulatoren und einem Mikroskop werden dünne Pipetten in beide Enden des Tubulus eingeführt. Eine Pipette injiziert die perfundierte Kochsalzlösung und die andere, die Sammelpipette, ist mit einem rot gefärbten hellen Öl gefüllt, um den Meniskus zu sehen, der die Trennung zwischen dem Öl und der perfundierten Kochsalzlösung markiert, die aus dem Tubulus kommt.
Da es jedoch schwierig ist, solch kleine Flüssigkeitsvolumina genau zu messen, wird die Volumenmessung mit einem radioaktiven Stoff durchgeführt, der in der perfundierten Kochsalzlösung enthalten ist und nicht vom Tubulus rückresorbiert werden kann.
Wenn wir das in der Sammelpipette gesammelte Endvolumen Vout, die Anfangs- und Endkonzentrationen der radioaktiven Verbindung Cin und Cout wissen, können wir mit Hilfe der einfachen Äquivalenz Cin * Vin = Cout * Vout das Anfangsvolumen Vin ableiten, das notwendig ist, um im Sammelröhrchen ein Vout von 1 Nanoliter zu erreichen. Indem wir das gesammelte Volumen Vout vom Eingangsvolumen Vin subtrahieren, können wir messen, wie viel Volumen auf dem Weg durch den Tubulus verloren gegangen ist, was manchmal als Reabsorptionsrate R bezeichnet wird.
Um diese Konzentrationen Cin und Cout zu berechnen, wird die Radioaktivität der Verbindung in der Probe mit einem Flüssigszintillationszähler gemessen.