RNA-Sequenzierung (RNA-Seq)

Die jüngste Entwicklung des Next Generation Sequencing ermöglicht es uns, das Transkriptom in einem bestimmten Gewebe zu einem bestimmten Entwicklungszeitpunkt zu sequenzieren. RNA-seq zeigt eine Momentaufnahme der vorhandenen RNAs und erlaubt uns sogar, die RNAs zu quantifizieren, um das Niveau der Genexpression zu bestimmen.

Die Instabilität der RNA-Moleküle macht es notwendig, die Transkripte für die Sequenzierung in DNA reversiv zu transkribieren.

Um die mRNA zu sequenzieren, müssen wir die folgenden Schritte durchführen:

  1. Isolierung der RNA

  2. Aufbereitung der mRNA

  3. Reverse Transkription von RNA zu cDNA

  4. DNA-Modifikationen für NGS

  5. Clusterbildung für NGS

  6. NGS