qPCR-Experiment

Während des qPCR-Experiments wird die Ziel-DNA genau wie bei einer normalen PCR-Reaktion wiederholt kopiert. Das SYBR-Green in der Mischung bindet an die doppelsträngigen DNA-Moleküle und macht sie fluoreszierend. Am Ende eines jeden Verlängerungsschritts wird ein Foto gemacht und die Stärke der Fluoreszenz quantifiziert.

Im Gegensatz zur normalen PCR kann man mit diesen Messungen die Menge der DNA-Fragmente in Echtzeit quantifizieren.

Nach dem letzten Zyklus misst der qPCR-Thermocycler die Fluoreszenz, während er die Temperatur stetig erhöht, um die Schmelzkurve aufzuzeichnen.

Die erhaltenen Messwerte werden zur Analyse an einen Computer gesendet .

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