Transfektionsmethoden

Es gibt mehrere Möglichkeiten, Nukleinsäuren in Säugetierzellen einzubringen, und es gibt keine Methode, die für alle Zelltypen geeignet ist. Daher wurden in den letzten Jahren zahlreiche Methoden und Reagenzien entwickelt, um die Transfektion einer breiten Palette von Zelllinien zu erleichtern. Diese Methoden lassen sich in drei Hauptgruppen einteilen:

• Chemische Verfahren: All diese Methoden beruhen auf demselben Prinzip: der Zugabe von positiv geladenen Molekülen, die zusammen mit der Nukleinsäure Komplexe bilden, um ihre Interaktion mit der Zellmembran und ihren anschließenden Eintritt in die Zelle zu ermöglichen. Die drei wichtigsten chemischen Methoden sind in Abbildung 1 zusammengefasst.

Abbildung 1: Chemische Verfahren. A. Lipidbasierte Transfektion, B. Transfektion auf Basis von Kalziumphosphat, C. Transfektion auf Basis kationischer Polymere

• Physikalische Verfahren: Bei diesen Methoden werden verschiedene physikalische Hilfsmittel zur Freisetzung von Nukleinsäuren eingesetzt, wobei die Elektroporation die häufigste ist.

• Biologische Verfahren: Bei diesen Verfahren, die häufig in der klinischen Forschung eingesetzt werden, kommen Viren zum Einsatz. Diese virusvermittelte Transfektion wird auch als Transduktion bezeichnet.