Waschen

Der Waschschritt beim ELISA-Test dient dazu, ungebundene Antigene, Antikörper und andere Moleküle, die die Ergebnisse beeinträchtigen könnten, auszuwaschen. Daher ist richtiges Waschen wichtig, und die Verwendung eines geeigneten Puffers gewährleistet ebenfalls genaue Ergebnisse. Unsachgemäßes Waschen kann zu falsch-positiven oder falsch-negativen Ergebnissen führen.

Unzureichendes Waschen führt zu starken Hintergrundsignalen, während übermäßiges Waschen zu einer verminderten Sensitivität führen kann, weil der Antikörper und/oder das Antigen aus dem Well gespült werden. Das Waschen erfolgt in einem physiologischen Puffer wie Tris-gepufferter Kochsalzlösung (TBS) oder phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS). Dem Puffer kann auch ein Reinigungsmittel wie 0,05%iges Tween-20 zugesetzt werden, um unspezifische Bindemittel zu entfernen. Ein hohes Signal-Rausch-Verhältnis ermöglicht eine einfache Detektion.