Ley de Beer-Lambert

La relación entre la absorbancia y la concentración es lineal, y se describe por medio de la ley de Beer-Lambert que se muestra en la figura 1.

La cantidad de luz de una longitud de onda concreta que absorbe una sustancia se puede calcular de dos maneras. La primera es tomar el logaritmo en base 10 de lo siguiente: la intensidad de la luz que se dirige a la muestra dividida entre la intensidad que sale de la muestra. La segunda manera es multiplicar la absortividad molar entre la concentración de la muestra y la longitud del recorrido.

Figura 1: La ley de Beer-Lambert, donde c es la concentración molar de la sustancia detectada, A es el valor de la absorbancia que da el espectrofotómetros en unidades arbitrarias (AU), ε epsilon es la absortividad molar, que depende de la longitud de onda, en molar por centímetro (M/cm), y L es la longitud del recorrido en cm.

La absortividad molar también puede llamarse coeficiente de extinción molar. Además, en la mayoría de los espectrofotómetros que usan cubetas estándar, la longitud del recorrido es de 1 cm.

Esta ecuación de Beer-Lambert se puede reorganizar fácilmente según lo que necesitemos para nuestros experimentos. Por ejemplo, para convertir valores de absorbancia en concentraciones, esta ecuación

A = εcl A es igual a epsilon multiplicado por c y por l

se puede organizar de esta manera:

c = A/εl c es igual a A dividida entre epsilon multiplicada por l