Beneficio de ejecutar la HPLC a altas temperaturas

Hay varios beneficios a la hora de realizar la separación de compuestos a temperaturas más elevadas. Además de disminuir los tiempos de ejecución, un aumento de la temperatura puede tener otros efectos beneficiosos. A medida que la temperatura aumenta, la viscosidad de la fase móvil disminuye, lo que da lugar a presiones menores. La menor viscosidad de la fase móvil también mejora la difusión en el sistema cromatográfico, creando picos más estrechos. Simultáneamente, los tiempos de retención menores generarán picos más estrechos. La existencia de picos más estrechos implica la presencia de picos más altos, suponiendo que hay la misma masa de muestra en la columna y, por lo tanto, unos límites de detección más bajos. Si deseas trabajar con los valores de la presión inicial, puedes reducir aún más el tiempo de ejecución aumentando el caudal con separaciones isocráticas hasta alcanzar la presión original.

Al aumentar la temperatura también aumenta la solubilidad del compuesto. Cuando un compuesto tiene una baja solubilidad, puede precipitar y obstruir la columna. Esto se puede evitar aumentando la temperatura. Sin embargo, hay que tener en cuenta que la estabilidad de los compuestos depende de la temperatura, especialmente en el caso de los compuestos biológicos. Cuando la temperatura es demasiado alta, estos compuestos se pueden degradar y no se podrá obtener una buena separación y medición.

Así que en muchos casos, un aumento de la temperatura puede tener múltiples beneficios, todo ello si no se producen cambios adversos en la selectividad.