Tipo de interacción en una columna de HPLC
Figura 1: Existen cuatro tipos de interacciones: interacciones no polares, interacciones polares, interacciones iónicas e interacciones basadas en el tamaño molecular.
Por lo general, las microesferas en columnas están compuestas de sílice o algún polímero. A la estructura se pueden adherir múltiples tipos de cadena, proporcionando diferentes tipos de interacciones:
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Interacciones basadas en la polaridad: los compuestos polares serán retenidos por fases estacionarias con cadenas polares, como -CN o -OH. Los compuestos no polares serán retenidos por los grupos no polares en la fase estacionaria, como -C8 o -C18.
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Interacciones iónicas: dependiendo del pH, algunos grupos pueden ser protonados o desprotonados, formando especies iónicas. Si el analito y la fase estacionaria tienen cargas opuestas, los analitos serán retenidos en la columna.
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Tamaño molecular: Las moléculas pequeñas pueden ser retenidas en los poros de la fase estacionaria, mientras que las moléculas grandes no quedarán atrapadas. Por lo tanto, las moléculas pequeñas permanecerán más tiempo en la columna, mientras que moléculas grandes pasarán más rápido.