Determinación del contenido de cafeína
El análisis por inyección en flujo puede utilizarse para determinar el nivel de cafeína en varios tipos de bebidas. Sin embargo, esto puede ser un reto. Junto con la cafeína hay muchos otros ingredientes, por ejemplo, el café, que pueden interferir en el resultado.
La cafeína puede detectarse mediante espectrofotometría porque las moléculas de cafeína que contienen estructuras aromáticas absorben la luz ultravioleta. Sin embargo, muchos otros compuestos del café y el té también contienen estructuras aromáticas, como los polifenoles. Estas otras estructuras aromáticas deben eliminarse primero para garantizar que es la cafeína la que se detecta y no otras estructuras aromáticas no deseadas. Se pueden eliminar los polifenoles tratando previamente las muestras con PVP (polivinilpirrolidona). Se trata de un material polimérico que aglutina los polifenoles pero no la cafeína.
Tras el pretratamiento, ahora tenemos una solución de café que no contiene polifenoles. Sin embargo, la teobromina, que es química y físicamente muy similar a la cafeína, sigue estando en la solución. La única diferencia entre las dos moléculas es un grupo metilo adicional que reside en la cafeína, pero no en la teobromina. Esto hace que la teobromina sea mucho menos soluble en agua que la cafeína. Por lo tanto, las dos se separan en el serpentín de mezcla del sistema del análisis por inyección en flujo utilizando el disolvente adecuado, aunque sólo después de eliminar los polifenoles con PVP.
La primera parte de la figura, como se indica en (a), muestra un análisis de muestras pretratadas con PVP, eliminando todos los polifenoles antes de pasarlas por la máquina de análisis por inyección en flujo (2, 4, 5 y 6). A continuación, el análisis por inyección en flujo es capaz de separar la teobromina (1) y la cafeína (3). El área bajo los dos picos es una medida de la concentración de las dos sustancias.
El último de los dos gráficos, como se indica en (b), es un análisis sobre muestras no pretratadas con PVP. En consecuencia, son visibles varios picos. Se trata de picos de polifenoles y, por consiguiente, no se separan los picos 1 y 3.
La figura muestra, por tanto, la importancia de pretratar las muestras con PVP.