Conjugado de enzimas
La conjugación de una enzima con un anticuerpo supone la formación de enlaces covalentes estables. Algunos ejemplos de las enzimas son: la peroxidasa de rábano picante (PHR), la ureasa y la fosfatasa alcalina (FA). Los anticuerpos pueden ser monoclonales o policlonales.
En ELISA, el anticuerpo conjugado con enzima puede ser un anticuerpo primario o secundario, dependiendo del tipo de ELISA que se realice. En cualquier caso, la enzima amplifica la señal (cuantos más conjugados de enzima se unan en el pocillo, más rápidamente aparecerán los productos y cuantos menos conjugados de enzima se unan en el pocillo, más tardarán los productos en formarse). En el caso de los productos cromogénicos, cuando se alcanza la intensidad de color deseada, se mide la absorbancia del producto directamente. En algunos casos, se usa una solución de parada para marcar el punto final del ensayo.