Secuenciación de primera generación

La secuenciación de primera generación, también conocida como secuenciación de Sanger, hace referencia al método de terminación de la cadena que desarrollaron Fredrick Sanger y sus colegas en 1977 (figura de abajo). La molécula de ADN se amplifica con nucleótidos modificados (ddNTP) y se permite la adición de una sola base por ciclo. A continuación, la molécula de ADN se amplifica con una longitud variable: cada cadena es un par de bases más largo que la molécula previa. A continuación, estas moléculas se separan por electroforesis capilar. Debido al tinte fluorescente al final de cada extremo, somos capaces de identificar la base (A, G, T o C) mediante la lectura de diferentes señales de color.

Método de terminación de la cadena. Las moléculas de ADN marcadas se separan en función de su tamaño. Cada molécula tiene un nucleótido modificado (ddNTP) que está marcado con tinte fluorescente. Cada color fluorescente indica una base específica: verde (A), amarillo (G), rojo (T) y azul (C).

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