Cromatografía de intercambio iónico

La cromatografía de intercambio iónico es un tipo de cromatografía líquida en la que las moléculas de la muestra se separan según su carga.

Se usa comúnmente para separar moléculas biológicas cargadas como proteínas, péptidos, aminoácidos o nucleótidos. Por ejemplo, los aminoácidos de las proteínas contienen grupos químicos cargados tanto positiva como negativamente. Las proteínas pueden tener una carga neta positiva o negativa o incluso no tener carga, dependiendo del pH de su entorno.

El pH donde la proteína no tiene carga se llama punto isoeléctrico. Por lo tanto, la elección del pH del tampón determina la carga neta de la proteína de interés. Si el pH del tampón es mayor que el punto isoeléctrico de la proteína de interés, la proteína tendrá una carga neta negativa. Por otro lado, un pH más bajo que el punto isoeléctrico hará que la proteína lleve una carga neta positiva.

Dependiendo de la carga neta de las moléculas a separar, la fase estacionaria debe seleccionarse en consecuencia. Además, dado que las muestras son mezclas de diferentes compuestos con diferentes cargas, normalmente se usa un gradiente de tampón para eluir cada compuesto diferente por separado (figura 1).

Figura 1: Ejemplo de cromatografía de intercambio iónico.