Depósito de fase móvil

Figura 1: Depósito de fase móvil compuesto de varias botellas de cristal con tapas especiales.

La separación de los analitos tiene lugar debido a las diferencias en las interacciones con la fase estacionaria y la fase móvil. Los analitos también tienen que ser eluidos para llegar al final de la columna, donde serán detectados por el detector. Este es el objetivo de la fase móvil, transportar los compuestos desde el punto de inyección hasta el detector.

Las fases móviles consisten en una mezcla de agua y un disolvente orgánico o mezclas de disolventes orgánicos. Si se requiere ajustar el pH, se utilizan soluciones tampón. Esto es importante cuando los analitos son sensibles a los cambios en el pH.

Los disolventes se colocan en los depósitos de fase móvil (figura 1), que consisten en una botella con una tapa especial con agujeros. En estos orificios, se coloca un tubo que conecta el depósito de fase móvil con la columna. La fase móvil se desplazará a través de estos tubos (figura 2), dentro de la columna y luego hacia el depósito de residuos.

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Figura 2: Filtro y tubos utilizados para conectar el depósito de fase móvil al instrumento de HPLC.

Técnicas:

Existen dos tipos de técnicas basadas en la composición de la fase móvil fase móvil durante el experimento.

• Modo isocrático: la composición de la fase móvil permanece constante durante el tiempo de ejecución.
• Elución en gradiente: la composición de la fase móvil cambia con el tiempo.