Clonación molecular

La clonación molecular se refiere al ensamblaje de las moléculas de ADN en un vector y a la subsecuente transformación de un organismo (a menudo levaduras o bacterias). Los métodos de clonación molecular son esenciales en la biología y la medicina. El término «clonación molecular» abarca muchas técnicas diferentes. El flujo habitual de la clonación molecular es el siguiente:

1. Aislamiento del gen de interés

2. Clonación del gen como vector

3. Transformación del organismo huésped por medio del vector

4. Selección antibiótica de las células transformadas

5. Aislamiento de los clones con el mismo fondo genético

La confirmación del ensamblaje de los plásmidos puede determinarse realizando la secuenciación del ADN. Es importante confirmar que los insertos se han ligado con éxito a un vector plásmido, con la conformación y el marco de lectura correctos. Un cambio en el marco puede provocar mutaciones sin sentido o de sentido erróneo que produzcan la expresión de proteínas no funcionales.

• Técnicas de clonación