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Cromatogramas

Los cromatogramas representan la fuerza de la señal adquirida por el detector de HPLC en relación con el tiempo. Antes de que el componente llegue al detector, hay una señal de ruido de fondo llamada «línea base». Cuando el componente alcanza el detector, esta señal empieza a aumentar hasta alcanzar un máximo y luego desciende hasta que se detectan todos los componentes. Este máximo se corresponde con la altura del pico. El tiempo que pasa desde la inyección hasta este pico máximo es el tiempo de retención (tR).

Desde la línea base, la curva tiene una parte definida bajo esta. Esta área del pico se usa para realizar calibraciones teniendo en cuenta que el área es proporcional a la concentración del compuesto. A mayor concentración, mayor serán el área y la altura del pico.

Gráfica con eje y descrito como respuesta del detector y eje x descrito como tiempo. La línea base de inyección de la muestra es una línea plana justo encima de cero. Una línea roja se curva hacia arriba desde la línea base en un punto temporal que se da como ejemplo y luego se curva hacia abajo, hacia la línea base. Hay una flecha que va desde la línea base hasta la parte superior del pico, descrita como altura del pico. Hay otra flecha que va desde la línea base hasta la mitad de la altura del pico, descrita como altura dividida por dos. El tiempo de retención es el tiempo que pasa desde el punto de inyección hasta el tiempo de la altura del pico.

Figura 1: Ejemplo de cromatograma.

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Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)