Aislamiento del ácido nucleico
El aislamiento del ácido nucleico consiste en la extracción de ADN o ARN (o ambos) de las células. Las fuentes de ADN son los glóbulos blancos de una muestra sanguínea (los glóbulos rojos no tienen núcleo, por lo que no contienen ADN), la saliva, los folículos pilosos, las cabezas de los espermatozoides, el tejido muscular, los huesos o los dientes. Con respecto al ARN, hay muchos tipos de moléculas de ARN en una célula. Al aislar el ARN de una muestra de tejido se aíslan todos los tipos de ARN (= ARN total).
Existen diferentes protocolos que se pueden seguir para el aislamiento de ácido nucleico, pero los pasos generales son:
- 1) Extracción del ácido nucleico (lisis y aislamiento)
- 2) Purificación del ácido nucleico
- 3) Análisis de cuantificación y pureza
Cuando se trabaja con ácidos nucleicos es muy importante proteger la muestra de la contaminación y degradación por ARNasas y ADNasas. Las RNAsas en particular son muy abundantes en el medioambiente, lo que puede degradar el ARN de una muestra. Por ello, el tejido se suele congelar en nitrógeno líquido a una temperatura de -196 °C (temperatura de ebullición del nitrógeno líquido). A esta temperatura tan baja, las enzimas se inactivan y todas las funciones biológicas se detienen.
Después de aislar los ácidos nucleicos puedes utilizar técnicas de aislamiento de secuencias para aislar secuencias específicas de ADN o ARN.