Análisis del aislamiento del ácido nucleico
La concentración del ácido nucleico y su pureza pueden determinarse midiendo su absorbancia por medio de un espectrofotómetro. Se trata de uno de los métodos más comunes para el análisis del ácido nucleico aislado. El NanoDrop es un espectrofotómetro especializado que puede medir absorbancias a partir de entre 0,5 y 2 μl de la muestra. Conduce la muestra hacia el interior de una columna utilizando la tensión de superficie (creando así algo parecido a una diminuta fibra óptica de solución de ADN) y mide la luz que pasa a través de ella a diferentes longitudes de onda.
Para evaluar la integridad o el nivel de degradación, hay que utilizar otras técnicas.
Figura 1: Ejemplo de resultado de la cuantificación de ARN por espectrofotometría de una muestra de ARN de alta calidad.
Normalmente, un espectrofotómetro o un NanoDrop estimará de manera automática la concentración de la muestra a partir de los datos incluidos. Tienes que indicar cuál es la naturaleza de la muestra (ARN, ADN, proteínas) y qué longitud de onda quieres medir. Para unos resultados más fiables, se recomienda que analices varios duplicados de tus muestras (si tienes suficiente material) y compares las mediciones de la concentración resultantes.