Enzimas de restricción
Las enzimas de restricción dividen la cadena de azúcar-fosfato del ADN bicatenario. Estas reconocen un sitio específico del ADN bicatenario y lo parten dentro de su sitio de reconocimiento o junto a él. Las enzimas de restricción son una herramienta muy importante en la biología molecular. Nos permiten cortar cadenas de ADN de manera muy predecible.
Los extremos resultantes se dividen en los siguientes tipos:
-
Extremos cohesivos: una cadena es más larga que la otra, lo que genera extremos 3’ o 5’ en voladizo.
-
Extremos romos: las dos cadenas se cortan por el mismo par de bases, lo que genera extremos sin voladizos.
A continuación, tenemos dos ejemplos de enzimas de restricción
XbaI (pronunciado Xba-uno): produce extremos cohesivos. Reconoce este sitio de restricción:
5'---T CTAGA---3'
3'---AGATC T---5'
I-SceI (pronunciado Sce-uno): tiene un sitio de restricción muy singular, que no se da de manera natural el genoma de los ratones ni en el de los humanos. Por eso, es muy útil para las restricciones altamente específicas. El Scel reconoce este sitio de restricción:
5'...TAGGGATAA CAGGGTAAT...3'
3'...ATCCC TATTGTCCCATTA...5'