Secuenciación de ARN (RNA-seq)

El reciente desarrollo de la secuenciación de nueva generación nos permite secuenciar el transcriptoma en un tejido concreto y en un momento específico de su desarrollo. La secuenciación del ARN revela una instantánea de los ARN presentes e incluso nos permite cuantificar los ARN, para así determinar los niveles de expresión génica.

La inestabilidad de las moléculas de ARN hace que sea necesario transcribir de manera inversa las transcripciones en ADN para la secuenciación.

Para secuenciar el ARNm tenemos que llevar a cabo los siguientes pasos:

1. Aislar el ARN.

2. Purificar el ARNm.

3. Revertir el ARN transcrito a ADNc.

4. Modificaciones del ADN para la NGS.

5. Generación de clústeres para la NGS.

6. NGS.