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Procedimiento experimental (pigmentos)

Primero, reúne los materiales necesarios para el experimento. Escribe en una tabla lo que encuentres.

  1. Muele las flores u hojas con un mortero; después, transfiere la pasta a un tubo de ensayo.

  2. Agrega metanol o acetona al material triturado. Tapa el tubo de ensayo y agita bien. Filtra la solución y transfiérela a otro tubo de ensayo.

  3. Utiliza un lápiz para marcar una línea a 3 cm del final del papel de filtro Whatman. Esta es la línea de referencia.

  4. Con un capilar obtenido con precisión, pon una mancha para el extracto de hojas y una mamcha para el extracto de flores en la línea de referencia; guarda un espacio entre ellas. Etiqueta estas manchas por debajo de la línea de referencia y anótalas en tu libro de laboratorio.

  5. Cuelga el papel de filtro en un frasco que contenga 20 ml de uno de los siguientes sistemas de disolventes: una mezcla con 19 ml de éter de petróleo y 1 ml de cloroformo (proporción 19:1) o una mezcla con 18 ml de éter de petróleo y 2 ml de acetona (relación 9:2). El papel debe colgar para que el solvente no toque la línea de referencia.

  6. Mantén el frasco lo más quieto posible hasta que la fase móvil haya subido dos tercios de la longitud del papel.

  7. Retira el papel de filtro del frasco. Utiliza un lápiz para marcar hasta dónde ha avanzado el disolvente y para delinear las manchas. Deja que el papel de filtro se seque.

  8. Mide hasta dónde ha avanzado el disolvente y el centro de las manchas con respecto a la línea de referencia.

  9. Determina la cantidad de pigmentos que están presentes en el extracto de hojas y flores.

  10. Calcula el valor de Rf de las diferentes manchas. Usa la ecuación que se encuentra aquí.


Paso A. Dibuja una línea de referencia a tres centímetros de la parte inferior con un lápiz. Coloca una etiqueta debajo de la línea de referencia para las muestras a y b. Paso B. Coloca el papel con cuidado en un frasco de disolvente. El papel está sujeto a un gancho que forma parte de la tapa. La línea de referencia está por encima del nivel de disolvente. Paso C. El disolvente sube por el papel de filtro. Las manchas son visibles. Paso D. El cromatograma. Hay tres manchas para la muestra a y dos manchas para la muestra b.

Figura 1: Experimento de separación de pigmentos. (A): trozo de papel de filtro marcado; (B): papel de filtro sumergido en disolvente; (C): ascenso del disolvente por el papel; (D): cromatograma.


Referencias:

  • NCERT Chromatography handbook