Procedimiento experimental (pigmentos)
Primero, reúne los materiales necesarios para el experimento. Escribe en una tabla lo que encuentres.
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Muele las flores u hojas con un mortero; después, transfiere la pasta a un tubo de ensayo.
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Agrega metanol o acetona al material triturado. Tapa el tubo de ensayo y agita bien. Filtra la solución y transfiérela a otro tubo de ensayo.
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Utiliza un lápiz para marcar una línea a 3 cm del final del papel de filtro Whatman. Esta es la línea de referencia.
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Con un capilar obtenido con precisión, pon una mancha para el extracto de hojas y una mamcha para el extracto de flores en la línea de referencia; guarda un espacio entre ellas. Etiqueta estas manchas por debajo de la línea de referencia y anótalas en tu libro de laboratorio.
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Cuelga el papel de filtro en un frasco que contenga 20 ml de uno de los siguientes sistemas de disolventes: una mezcla con 19 ml de éter de petróleo y 1 ml de cloroformo (proporción 19:1) o una mezcla con 18 ml de éter de petróleo y 2 ml de acetona (relación 9:2). El papel debe colgar para que el solvente no toque la línea de referencia.
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Mantén el frasco lo más quieto posible hasta que la fase móvil haya subido dos tercios de la longitud del papel.
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Retira el papel de filtro del frasco. Utiliza un lápiz para marcar hasta dónde ha avanzado el disolvente y para delinear las manchas. Deja que el papel de filtro se seque.
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Mide hasta dónde ha avanzado el disolvente y el centro de las manchas con respecto a la línea de referencia.
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Determina la cantidad de pigmentos que están presentes en el extracto de hojas y flores.
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Calcula el valor de Rf de las diferentes manchas. Usa la ecuación que se encuentra aquí.
Figura 1: Experimento de separación de pigmentos. (A): trozo de papel de filtro marcado; (B): papel de filtro sumergido en disolvente; (C): ascenso del disolvente por el papel; (D): cromatograma.
Referencias:
- NCERT Chromatography handbook