Siembra por extensión

La siembra por extensión es un método de distribución uniforme de microorganismos sobre la superficie de una placa de agar. Con la ayuda de un esparcidor estéril, se extiende un pequeño volumen de cultivo microbiano uniformemente sobre la superficie del agar.

Existen muchas técnicas diferentes de extensión. En algunas de ellas se usan esferas de vidrio estériles que ruedan sobre la superficie del agar y esparcen las células. A menudo se utilizan herramientas especializadas llamadas esparcidores. En la imagen siguiente se muestra un esparcidor de plástico desechable y un esparcidor de metal reutilizable.

A continuación se describe el procedimiento de extensión con un esparcidor de vidrio reutilizable:

• Esteriliza el esparcidor de vidrio con la llama de un mechero Bunsen. En primer lugar, sumerge el esparcidor de vidrio en alcohol (etanol al 70 %), sacude el exceso de alcohol y prende fuego al residuo. A continuación, deja que el esparcidor se enfríe.
• Extiende el cultivo microbiano uniformemente sobre la superficie de la placa. Debes aplicar una presión uniforme a medida que el vidrio se extiende a lo largo de la superficie del medio.
• Deja que la placa absorba el cultivo microbiano.
• Incuba la placa boca abajo para evitar que se formen gotas de agua (condensación).

La extensión se utiliza para aislar células individuales de cultivos muy diluidos, como las células transformadas después de la clonación. Después de esparcir las células en la placa de agar, cada célula producirá colonias de clones. Si la solución celular contiene demasiadas células, no se podrán aislar colonias de forma individual. En este caso, se debe utilizar el método de la siembra por estría para aislar colonias individuales.

It is important to pick a single colony to isolate pure genetic clones. A colony is a group of cells that originated from the same source; therefore, all the cells in a single colony contain identical genetic information.