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Análisis de repeticiones cortas en tándem (STR)

Una de las maneras más comunes de obtener un perfil de ADN es mediante un análisis de repeticiones cortas en tándem (STR). El procedimiento es el siguiente:

  • 1) Extraer y purificar el ADN de una muestra.

  • 2) Usar la técnica de PCR para amplificar las repeticiones cortas en tándem (STR). Un conjunto de cebadores situados en las regiones laterales de una secuencia variable amplificará fragmentos de diferente longitud en función del número de repeticiones (ver la imagen a continuación). Existe la posibilidad de que dos individuos compartan el mismo número de repeticiones en un sitio determinado. Si usásemos solo un conjunto de cebadores (si amplificásemos solo una región repetida), el riesgo de que dos individuos compartiesen el mismo número de repeticiones sería demasiado alto. Por eso, al realizar un perfil genético, se estudian al menos 13 sitios de repetición en tándem.

  • 3) Usar electroforesis en gel para analizar la longitud de las repeticiones en tándem y obtener el perfil genético.

Potenciales unidades de repeticiones cortas en tándem y longitudes de fragmentos de la región diana. Se muestran cadenas de ADN con un número variable de unidades de repetición. En cada hebra, hay un cebador al principio y al final de las unidades de repetición en tándem, de modo que el tamaño del fragmento amplificado variará dependiendo del número de veces que se repita cada unidad. En el ejemplo, hay 5 longitudes de fragmento diferentes, que corresponden a un número diferente de unidades de repetición en tándem, de 7 a 11 unidades. Las unidades de repetición pueden tener un número diferente de nucleótidos. Por ejemplo, una unidad de repetición de 2 nucleótidos podría ser C.A repetida consecutivamente. El número de unidades repetidas determinará el tamaño del fragmento y puede variar de un individuo a otro. Las unidades de repetición también pueden estar formadas por 3, 4 o incluso 5 nucleótidos.