Experimento de PCR cuantitativa

Durante el experimento de PCR cuantitativa, el ADN objetivo se copia repetidamente, igual en en una reacción PCR normal. El verde SYBR de la mezcla se une a las moléculas bicatenarias de ADN, lo cual hace que se vuelva fluorescente. Al final de cada paso de extensión, se toma una fotografía y se cuantifica la fuerza de la fluorescencia.

A diferencia de lo que pasa en la PCR normal, estas medidas permiten conocer la cantidad de fragmentos de ADN en tiempo real.

Tras el último ciclo, el termociclador de PCR cuantitativa mide la fluorescencia al mismo tiempo que hace aumentar la temperatura de manera estable para grabar la curva de fusión.

La medida obtenida se envía a un ordenador para su análisis.