Lavado
La fase de lavado en ELISA sirve para eliminar los antígenos, anticuerpos y otras moléculas que no están unidos y que pueden interferir con los resultados. Por ello, es importante realizar un lavado adecuado. El uso de una solución tampón apropiada también garantizará que los resultados sean exactos. Un lavado inadecuado puede dar lugar a falsos positivos o falsos negativos.
Un lavado insuficiente dará lugar a un ruido de fondo alto, mientras que un lavado excesivo podría dar lugar a una reducción de la sensibilidad debido a la elución del anticuerpo o del antígeno del pocillo. El lavado se realiza en una solución tampón fisiológica, como la solución salina tamponada con Tris (TBS) o la solución salina tamponada con fosfato (PBS). También se puede añadir un detergente, como el Tween-20 al 0,05 %, a la solución tampón para ayudar a eliminar los aglutinantes no específicos. Una relación señal:ruido elevada facilita la detección.