Le milieu de culture cellulaire

Le milieu de culture constitue le composant le plus important de l'environnement de culture, car il apporte non seulement les nutriments, les facteurs de croissance et les hormones nécessaires à la croissance cellulaire, mais assure également la régulation du pH et de la pression osmotique de la culture. Les trois classes élémentaires de milieux sont les milieux basal, à teneur réduite en sérum et sans sérum, qui se distinguent par leur besoin de supplémentation en sérum.

Le milieu basal

La plupart des lignées cellulaires se développent correctement dans les milieux basaux, qui renferment une source de carbone telle que le glucose, les vitamines, les sels inorganiques et les acides aminés. Parmi ces acides aminés, on trouve la L-glutamine, qui joue un rôle important dans le cycle de Krebs. Il faut une supplémentation de ces composants du milieu basal en sérum et, après utilisation, les conserver à 4 °C pour éviter la dégradation de la L-glutamine.

Le sérum

Pour la culture de cellules en milieu basal, le sérum est la principale source de facteurs de croissance et d'adhésion, d'hormones, de lipides et de minéraux. De plus, le sérum régule également la perméabilité de la membrane cellulaire et sert de véhicule pour les lipides, les enzymes, les micronutriments et les oligo-éléments dans la cellule. Il est préférable de conserver le sérum à -20 °C. Toutefois, afin d'éviter un trop grand nombre de cycles de congélation/décongélation qui pourraient compromettre la viabilité de ses composants. Il est recommandé de le conserver en aliquotes.

Le milieu de culture complet

Le mélange constitué du milieu basal et du sérum est appelé milieu de culture complet, car il fournit tous les composants nécessaires à la survie et à la prolifération des cellules. Après utilisation, le milieu complet doit être conservé au réfrigérateur pour préserver l'intégrité de tous les composants.

Le milieu conditionné

Il s'agit d'un milieu de culture cellulaire qui a déjà été partiellement utilisé par les cellules. Bien que dépourvu de certains composants, il est enrichi en matériel issu des cellules, dont probablement de petites quantités de facteurs de croissance. Ce genre de milieu conditionné convient à la croissance des cellules à une densité beaucoup plus faible et, mélangé à du milieu frais, il est très utile pour le clonage.