Mesure du signal FACS

Les équipements FACS peuvent mesurer la quantité de fluorescence émise par les cellules après que les fluorophores qu'elles contiennent ou qui leur sont attachés ont été excités par le faisceau laser. Le système mesure également la lumière diffusée par les cellules lorsqu'elles traversent le faisceau laser. Il existe deux types différents de diffusion de la lumière (figure 1) :

• La diffusion vers l'avant (FSC) : Il s'agit d'une mesure de la lumière principalement diffractée. Elle est détectée dans la direction avant, juste à côté de l'axe du faisceau laser incident, par une photodiode. Elle permet d'obtenir la taille des cellules et constitue une méthode appropriée pour détecter les particules supérieures à une taille donnée, indépendamment de leur fluorescence.

• La diffusion latérale (SSC) : Il s'agit d'une mesure de la lumière principalement réfractée et réfléchie qui se produit à toute interface à l'intérieur de la cellule où il y a un changement d'indice de réfraction (Figure 3-1). La SSC est collecté à environ 90 degrés du faisceau laser par une lentille de collecte, puis redirigé par un séparateur de faisceau vers le détecteur approprié. Il est proportionnel à la granularité de la cellule ou à sa complexité interne.

Figure 1 : Diffusion de la lumière détectée par un équipement FACS.