Le séquençage de première génération
Le séquençage de première génération, également appelé séquençage de Sanger, désigne la méthode de terminaison de chaîne mise au point par Fredrick Sanger et ses collaborateurs en 1977 (voir figure ci-dessous). La molécule d'ADN est amplifiée avec des nucléotides modifiés (ddNTP) et l'ajout d'une seule base par cycle est autorisé. L'ADN est ensuite amplifié avec une longueur variable : chaque brin sera plus long d'une paire de bases que la molécule précédente. Ces molécules sont ensuite séparées par électrophorèse capillaire. Grâce au colorant fluorescent à l'extrémité de chaque fragment, nous pouvons identifier la base (A, G, T ou C) en lisant le signal de couleur différente.
La méthode de terminaison de chaîne. Les molécules d'ADN marquées sont séparées en fonction de leur taille. Chaque molécule possède un nucléotide modifié (ddNTP) qui est marqué par un colorant fluorescent. Chaque couleur de fluorescence indique une base spécifique : vert (A), jaune (G), rouge (T) et bleu (C).
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