L'immunofluorescence

L'immunofluorescence est une technique qui tire parti de la liaison spécifique anticorps-antigène pour cibler des fluorophores sur des biomolécules dans la cellule. Les fluorophores sont attachés, ou conjugués, à des anticorps (voir figure 1). Ces anticorps marqués par fluorescence peuvent se lier à la cible directement (anticorps primaires) ou indirectement (anticorps secondaires). L'immunofluorescence secondaire utilise un anticorps primaire non fluorescent qui se lie à la cible, ainsi qu'un anticorps secondaire marqué par fluorescence qui se lie à l'anticorps primaire.

Figure 1 : Anticorps marqués par fluorescence se liant à une molécule d'intérêt soit directement (à gauche, anticorps primaire uniquement), soit indirectement (à droite, anticorps primaire et secondaire).

Bien qu'ils prennent plus de temps, les anticorps secondaires permettent une plus grande flexibilité. Le même anticorps primaire peut être marqué avec différentes couleurs, par exemple. Comme plusieurs anticorps secondaires peuvent se lier à un seul anticorps primaire, le signal peut également être amplifié.