La PCR quantitative et la transcription inverse
La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une méthode permettant de générer des copies de séquences d'ADN spécifiques en laboratoire. Comme pour la réplication de l'ADN dans la cellule, l'ADN double brin est séparé et chaque brin sert de matrice pour un brin complémentaire. À chaque cycle de réplication, la quantité d'ADN double. Contrairement à la réplication de l'ADN dans la cellule, le processus de réplication commence par la liaison d'une courte séquence complémentaire appelée amorce à l'ADN cible.
La PCR quantitative (QPCR) est une variation de la PCR où la quantité initiale d'ADN dans l'échantillon est déterminée en mesurant la vitesse de réplication. Grâce à l'utilisation de sondes fluorescentes ou de colorants qui ne deviennent fluorescents que lorsqu'ils sont liés à l'ADN double brin, la réplication peut être mesurée en temps réel. En utilisant des amorces spécifiques à un certain agent pathogène, la génération d'ADN et donc de fluorescence est une indication de la présence d'ADN de cet agent pathogène.