L'isolement des acides nucléiques
L'isolement des acides nucléiques consiste à extraire l'ADN et/ou l'ARN des cellules. Les sources d'ADN sont les globules blancs (les globules rouges n'ont pas de noyau et ne contiennent donc pas d'ADN), la salive, les follicules pileux, les têtes de spermatozoïdes, les tissus musculaires, les os et les dents. Une cellule contient de nombreux types de molécules d'ARN. Lors de l'isolement de l'ARN d'un échantillon de tissu, tous les types d'ARN (= ARN total) sont isolés.
Différents protocoles peuvent être suivis pour l'isolement des acides nucléiques, mais en règle générale, les étapes sont les suivantes :
- 1) L'extraction des acides nucléiques (lyse et isolement)
- 2) La purification des acides nucléiques
- 3) L'analyse de quantification et de pureté
Lorsqu'on manipule des acides nucléiques, il est très important de protéger l'échantillon contre toute contamination et dégradation par les RNases (ribonucléases) et les ADNases (désoxyribonucléases). Les RNases sont particulièrement abondants dans l'environnement et peuvent dégrader l'ARN de votre échantillon. Pour cette raison, les tissus sont généralement congelés dans de l'azote liquide à -196°C (la température d'ébullition de l'azote liquide). À cette température, les enzymes sont inactivées et toutes les fonctions biologiques s'arrêtent.
Après avoir isolé les acides nucléiques, vous pouvez utiliser les techniques d'isolement des séquences pour isoler des séquences spécifiques de votre ADN ou ARN.