La pureté de l'acide nucléique

La pureté de l'acide nucléique peut être déterminée en mesurant l'absorbance à différentes longueurs d'onde.

Les acides nucléiques absorbent fortement la lumière à 260 nm, les protéines à 280 nm, tandis que les contaminants chimiques (tels que les composés organiques phénol et trizol) absorbent la lumière à 230 nm. En outre, l'absorbance à 320 nm peut également être mesurée pour vérifier toute autre contamination particulaire.
Par conséquent, vous pouvez facilement évaluer la pureté de l'acide nucléique en calculant le rapport pour 260/280 nm, 260/230 nm et 260/320 nm.

Chaque rapport a une valeur spécifique qui détermine la pureté de l'échantillon :
- Pour 260/280, un rapport d'environ 1,8 est communément accepté comme de l'ADN pur. Pour l'ARN, le rapport doit être plus élevé, soit environ 2 %.
- Pour 260/230, un rapport supérieur à 1,8 est accepté comme un échantillon d'acide nucléique pur.
- Pour 260/320, un rapport de 1,8-2,2 signifie généralement que l'échantillon d'acide nucléique est accepté comme pur.