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La digestion par enzymes de restriction

Les enzymes de restriction peuvent être utilisées comme des ciseaux moléculaires qui coupent spécifiquement les séquences d'ADN. L'activité optimale de chaque enzyme de restriction est affectée par des conditions telles que la température, le pH, le cofacteur de l'enzyme, la composition de sel et la force ionique.

La digestion par enzymes de restriction possède les applications suivantes :

  • Le clonage moléculaire, pour cloner des fragments d'ADN dans un plasmide.

  • La cartographie de restriction tire parti de la spécificité de la séquence des enzymes de restriction. Si la séquence d'un fragment d'ADN est connue, il est possible d'utiliser une digestion par enzymes de restriction et une électrophorèse sur gel pour identifier des séquences spécifiques, comme une empreinte moléculaire.

  • La digestion de génomes entiers pour l'analyse par transfert de Southern.