Les enzymes de restriction

Les enzymes de restriction coupent la chaîne sucre-phosphate de l'ADN double brin. Elles reconnaissent un site spécifique de l'ADN double brin et le coupe à l'intérieur ou à proximité de leur site de reconnaissance. Les enzymes de restriction sont un outil très important en biologie moléculaire. Elles nous permettent de couper les brins d'ADN d'une manière très prévisible.

Les extrémités après avoir été coupées sont les suivantes :

Extrémités cohésives à bouts collants : un brin est plus long que l'autre, ce qui entraîne un surplomb en 3' ou en 5'.
Extrémités à bouts francs : les deux brins sont coupés au niveau de la même paire de bases, ce qui donne une extrémité sans débordement.

Voici deux exemples d'enzymes de restriction :

XbaI (prononcé Xba-un) : elle produit des extrémités collantes. Elle reconnaît le site de restriction suivant :

5'---T CTAGA---3'

3'---AGATC T---5'

I-SceI (prononcé Sce-un) : elle possède un site de restriction très unique qui ne se trouve pas naturellement dans les génomes de souris ou d'humains. Elle est donc très utile pour les restrictions très spécifiques. SceI reconnaît les sites de restriction suivant :

5'...TAGGGATAA CAGGGTAAT...3'

3'...ATCCC TATTGTCCCATTA...5'