Vecteur rétroviral
Le virus est un véhicule ou un vecteur de transfert de gènes souhaitable en raison de sa capacité à transporter et à délivrer efficacement des gènes étrangers pour obtenir une expression génétique stable,
Les vecteurs les plus couramment utilisés sont développés à partir des rétrovirus, de l'adénovirus, du virus de l'herpès simplex (HSV) et du virus adéno-associé (AAV). Parmi les types de virus qui sont généralement utilisés en thérapie génique clinique, le rétrovirus est le principal système d'administration en raison de son efficacité.
Figure 1: Transfert de gènes à l'aide de lentivirus
Afin d'augmenter la biosécurité du vecteur, le gène du vecteur rétroviral est modifié en supprimant jusqu'à six gènes essentiels à la réplication et à la pathogenèse du VIH. Le principe général du transfert de gènes par vecteur lentivirus est décrit comme suit :
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Les gènes qui codent pour la protéine de structure (gag, pol et env) sont supprimés du vecteur viral (plasmide).
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Le vecteur viral porte le gène d'intérêt/gène étranger et l'emballage psi.
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Le vecteur viral est co-transfecté avec les plasmides d'empaquetage qui portent les gènes structurels viraux à la lignée cellulaire d'empaquetage 293FT.
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Le lentivirus recombinant est produit dans la lignée cellulaire 293FT avant d'être extrait.
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La particule de lentivirus recombinant est transduite dans les cellules cibles, où se produisent la transcription inverse, l'intégration du gène étranger et l'expression ectopique du gène étranger.