La procédure de l'expérience (pigments)
Commencez par rassembler les matériaux nécessaires à l'expérience. Notez vos résultats dans un tableau.
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Broyez les fleurs ou les feuilles avec un pilon et un mortier et transférez ensuite la pâte dans un tube à essai.
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Ajoutez du méthanol ou de l'acétone à la matière broyée. Bouchez le tube à essai et agitez bien. Filtrez la solution, et transférez la solution filtrée dans un autre tube à essai.
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A l'aide d'un crayon, marquez une ligne à 3 cm de l'extrémité du papier filtre Whatman. Il s'agit de la ligne de référence.
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À l'aide d'un capillaire finement dessiné, placez une tache pour l'extrait des feuilles, et une tache pour l'extrait des fleurs sur la ligne de référence avec un espace entre les taches. Marquez ces points sous la ligne de référence et notez les informations dans votre cahier de laboratoire.
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Suspendez le papier filtre dans un bocal contenant 20 ml de l'un des systèmes de solvant suivants : un mélange avec 19 ml d'éther de pétrole et 1 ml de chloroforme (rapport 19:1), ou un mélange avec 18 ml d'éther de pétrole et 2 ml d'acétone (rapport 9:2). Le papier doit être suspendu de façon à ce que le solvant ne touche pas la ligne de référence.
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Maintenez le pot aussi immobile que possible jusqu'à ce que la phase mobile ait remonté les deux tiers de la longueur du papier.
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Retirez le papier filtre du bocal. Utilisez un crayon pour marquer le front du solvant et délimiter les points. Laissez le papier filtre sécher.
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Mesurez la distance parcourue par le front du solvant et le centre des points par rapport à la ligne de référence.
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Déterminez le nombre de pigments qui sont présents dans l'extrait des feuilles et des fleurs.
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Calculez la valeur Rf des différentes taches. Utilisez l'équation trouvée ici.
Figure 1 : Expérience de séparation des pigments. (A) Le morceau de papier filtre marqué, (B) Le papier filtre plongé dans le solvant, (C) Le solvant se déplaçant sur le papier, (D) Le chromatogramme.
Références :
- Manuel de chromatographie NCERT