L'étalement

L'étalement désigne une méthode permettant de répartir uniformément les micro-organismes sur la surface d'une plaque de gélose. Un petit volume de culture microbienne est réparti uniformément sur la surface de la gélose à l'aide d'un étaleur stérile.

Il existe de nombreuses techniques d'étalement différentes. Certaines techniques utilisent des billes de verre stériles qui peuvent être roulées sur la surface de la gélose pour répartir les cellules. Souvent, des outils spécialisés appelés étaleurs sont utilisés. L'image ci-dessous montre un étaleur en plastique jetable et un étaleur en métal réutilisable.

Voici un aperçu de la procédure d'étalement à l'aide d'un étaleur en verre réutilisable.

• Un étaleur en verre doit être stérilisé à l'aide d'une flamme de bec Bunsen. Trempez d'abord l'étaleur en verre dans de l'alcool (éthanol à 70 %) et secouez-le pour éliminer l'excès d'alcool et enflammez le résidu. Laissez ensuite refroidir l'étaleur.
• Répartissez uniformément la culture microbienne sur la surface de la plaque de gélose. Appliquez une pression uniforme lorsque vous étalez la culture sur la gélose.
• Laissez la culture microbienne être absorbée par la plaque de gélose.
• Incubez la plaque en la retournant pour éviter la formation de gouttelettes d'eau (condensation) sur la plaque.

L'étalement est utilisé pour isoler des cellules uniques de cultures hautement diluées, telles que des cellules transformées après clonage. Après avoir étalé les cellules sur la plaque de gélose, chaque cellule produira des colonies de clones. Si la solution cellulaire contient trop de cellules, il n'est pas possible d'isoler des colonies individuelles. Dans ce cas, la méthode d'isolement doit être utilisée pour isoler des colonies uniques.

Il est important de choisir une seule colonie pour l'isolement des clones génétiques purs. Une colonie est un groupe de cellules qui proviennent de la même souche. Par conséquent, toutes les cellules d'une seule colonie contiennent des informations génétiques identiques.