L'expérience qPCR
Au cours de l'expérience de qPCR, l'ADN cible est copié de manière répétée, comme dans une réaction PCR normale. Le vert SYBR contenu dans le mélange se lie aux molécules d'ADN double brin, ce qui le rend fluorescent. À la fin de chaque étape d'extension, une photographie est prise et l'intensité de la fluorescence est quantifiée.
Contrairement à la PCR normale, ces mesures vous permettent de quantifier la quantité de fragments d'ADN en temps réel.
Après le dernier cycle, le thermocycleur qPCR mesure la fluorescence tout en augmentant régulièrement la température pour enregistrer la courbe de fusion.
Les mesures obtenues sont envoyées à un ordinateur pour analyse.