Les types de test ELISA

Tous les tests ELISA reposent sur l'interaction spécifique entre l'anticorps et l'antigène. Il existe de nombreuses variantes de la méthode ELISA. Voici une liste des types de test ELISA les plus courants :

ELISA direct

• Avantages

  • Plus rapide, car il n'utilise qu'un seul anticorps.
  • Il élimine la réactivité croisée entre les anticorps.

• Inconvénients

  • Inflexible et coûteux : l'anticorps primaire doit être marqué individuellement et ne peut pas être utilisé pour plusieurs expériences.
  • Le signal est moins amplifié.

• Est généralement utilisé pour : analyser la réponse immunitaire à un antigène.

ELISA indirect

• Avantages

  • Haute sensibilité : l'anticorps primaire possède plusieurs épitopes qui peuvent être liés par plusieurs anticorps secondaires marqués, ce qui amplifie le signal.
  • Flexibilité : différents anticorps primaires de détection peuvent être utilisés avec un seul anticorps secondaire marqué.
  • De nombreuses variantes d'anticorps secondaires marqués sont disponibles dans le commerce.

• Inconvénients

  • Une réaction croisée peut se produire avec l'anticorps secondaire.
  • Nécessite des étapes d'incubation supplémentaires.

Figure 1 : Type de test ELISA

• Est généralement utilisé pour : déterminer la concentration totale d'anticorps dans les échantillons.

ELISA en sandwich

• Avantages

  • Sensibilité très élevée : Deux anticorps sont utilisés afin que l'antigène soit spécifiquement capturé et détecté. L'antigène n'a pas besoin d'être purifié avant la mesure.
  • Flexibilité** : La détection directe et la détection indirecte peuvent être utilisées.

• Inconvénient

  • Une paire appariée est nécessaire : L'optimisation de la combinaison d'anticorps peut être difficile. Chaque anticorps doit réagir avec un épitope spécifique sur la protéine cible et ne peut pas avoir de réaction croisée avec son anticorps partenaire.

• Est généralement utilisé pour : analyser des échantillons complexes. Il n'est pas nécessaire de purifier l'antigène avant d'utiliser cette méthode.

ELISA par compétition

• Avantages

  • Haute sensibilité : il peut détecter spécifiquement des antigènes en quantité relativement faible.
  • Ne nécessite aucun traitement de l'échantillon.
  • Plus grande précision, exactitude et reproductibilité.

• Inconvénient

  • Faux positifs : faible spécificité.

• Est généralement utilisé pour : détecter de petits antigènes qui ne peuvent pas être liés par deux anticorps différents comme dans la technique ELISA en sandwich. Cette méthode ELISA est généralement utilisée lorsqu'un seul anticorps est disponible pour l'antigène.