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Le western blot

Le western blot, aussi appelé transfert de protéines, est une méthode importante d'identification des protéines. Un western blot permet de détecter une protéine spécifique dans une solution qui contient de nombreuses autres protéines. Le terme western blot fait spécifiquement référence au transfert de protéines et à leur détection à l'aide d'anticorps.

Le flux expérimental commence sur le côté gauche de l'image. Sous la lettre A, on voit la fiole contenant de nombreuses petites molécules de trois couleurs différentes. La flèche pointe de la fiole sur la membrane rectangulaire alignée verticalement bleue sous la lettre B. Sur la surface de la membrane, trois molécules colorées sont séparées en trois groupes, un groupe en haut de la membrane, un au milieu et un en bas. La flèche épaisse pointe de la membrane bleue sur une autre image de la membrane rectangulaire bleue avec derrière elle une membrane rectangulaire plus fine jaune, également alignée verticalement, sous la lettre C. Les flèches fines traversent la membrane bleue sur la membrane jaune, indiquant le passage des molécules colorées. Une autre flèche pointe vers la droite sur la nouvelle image de la membrane rectangulaire jaune, sous la lettre D, avec quatre structures en forme d'antigènes dans le coin supérieur gauche de la membrane. Enfin, la dernière flèche pointe sur la membrane rectangulaire grise, sous la lettre E, avec une bande noire dans le coin supérieur gauche de celle-ci.

Figure 1 : Les étapes expérimentales du western blot. Après la préparation des échantillons (A), les échantillons sont chargés sur un gel de polyacrylamide SDS (B) et séparés par électrophorèse sur gel. À l'étape suivante, les protéines séparées sont transférées sur une membrane (C) et détectées par des anticorps ciblant la protéine d'intérêt (D). Enfin, les bandes de protéines détectées sont visualisées sur la membrane (E).