Principi della HPLC
Figura 1. Componenti di un modello di HPLC
Come mostrato nella Figura 1, questo metodo utilizza una colonna riempita con piccole particelle che formano la fase stazionaria e un solvente conosciuto come fase mobile il quale, come suggerito dal nome, si muove attraverso la colonna grazie alla pressione generata da una pompa.
Quando una miscela di analiti A, B e C passa attraverso la colonna, questi interagiranno in maniera diversa con la fase stazionaria in base delle loro proprietà. Gli analiti che interagiscono di meno con la fase stazionaria si muoveranno più velocemente (A). Al contrario, gli analiti che interagiscono di più con la fase stazionaria rimarranno più a lungo nella colonna (C) e raggiungeranno il rilevatore per ultimi.
In cromatografia, i composti che sono simili si attraggono allo stesso modo. I composti polari sono maggiormente attratti da altri composti polari e i composti non polari sono maggiormente attratti da altri composti non polari.