Vantaggi dell'eseguire la HPLC ad alte temperature
Ci sono diversi vantaggi nell'eseguire la separazione dei composti a temperature più elevate. Oltre alla riduzione dei tempi di esecuzione, un aumento della temperatura può avere altri effetti benefici. All'aumentare della temperatura, la viscosità della fase mobile diminuirà, con conseguente riduzione delle pressioni. La minore viscosità della fase mobile migliora anche la diffusione nel sistema cromatografico, fornendo picchi più ravvicinati. Contemporaneamente, tempi di ritenzione più brevi genereranno picchi più ravvicinati. Assumendo la stessa massa di campione sulla colonna, avere picchi più ravvicinati significa avere picchi più alti e quindi limiti di rilevamento inferiori. Se invece preferisci lavorare alla pressione originale, puoi ridurre ulteriormente il tempo di esecuzione aumentando la portata con separazioni isocratiche fino a quando la pressione originale nn viene raggiunta.
L'aumento della temperatura aumenta anche la solubilità del composto. Quando un composto ha una bassa solubilità, può precipitare e ostruire la colonna. Questo può essere evitato aumentando la temperatura. Tuttavia bisogna anche considerare che la stabilità dei composti dipende dalla temperatura, soprattutto nei composti biologici. Quando la temperatura è troppo alta, questi composti possono degradarsi e non sarà possibile ottenere una buona separazione e misurazione.
Quindi, in molti casi, un aumento della temperatura può avere molteplici benefici, se non si riscontrano cambiamenti sfavorevoli di selettività.