Terreni di coltura cellulare

Il terreno di coltura è il componente più importante dell'ambiente di coltura cellulare, perché non solo fornisce i nutrienti, i fattori di crescita e gli ormoni necessari per lo sviluppo delle cellule, ma regola anche il pH e la pressione osmotica della coltura. Le tre categorie fondamentali di terreni sono i terreni di base, i terreni con contenuto ridotto di siero e i terreni privi di siero, caratterizzati da diverse esigenze di integrazione col siero.

Terreno di base

La maggior parte delle linee cellulari cresce bene nei terreni di base che contengono fonti di carbonio come il glucosio, oltre a vitamine, sali inorganici e amminoacidi. Uno di questi amminoacidi è la L-glutammina, che svolge un ruolo importante nel ciclo di Krebs. Questi terreni basali devono essere ulteriormente integrati col siero e, dopo l'utilizzo, è necessaria la conservazione a 4°C per evitare la degradazione della L-glutammina.

Siero

Il siero è la principale fonte di fattori di crescita e adesione, ormoni, lipidi e minerali per la coltura delle cellule nei terreni di base. Inoltre il siero regola anche la permeabilità della membrana cellulare e funge da vettore per lipidi, enzimi, micronutrienti e oligoelementi nella cellula. Il modo migliore per conservare il siero è a una temperatura di -20°C. Tuttavia, per evitare un numero eccessivo cicli di congelamento/scongelamento che potrebbero compromettere l'integrità dei suoi componenti, si consiglia di frazionarlo e conservarlo in aliquote separate.

Terreno di coltura arricchito

La miscela formata da terreno di base e siero è detta terreno di coltura arricchito, perché fornisce tutti i componenti necessari per la sopravvivenza e la proliferazione cellulare. Dopo averlo utilizzato, il terreno arricchito deve essere conservato in frigorifero per preservare l'integrità di tutti i suoi componenti.

Terreno condizionato

Si tratta di un terreno di coltura cellulare che è già stato parzialmente utilizzato dalle cellule. Sebbene risulti impoverito di alcuni componenti, è arricchito con materiali derivanti dalle cellule; tra di essi è probabile che si trovino dei piccoli quantitativi di fattori di crescita. Un terreno di questo tipo, condizionato dalle cellule, supporterà la crescita di cellule a una densità molto più bassa e, mescolato con un terreno fresco, sarà molto utile nella clonazione.