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Riparazione delle estremità

Generalmente il DNA frammentato (sia frammentato artificialmente che parzialmente degradato) ha estremità coesive, il che implica che un filamento è più lungo dell'altro (vedi Figura 1).

Sono presenti due filamenti di DNA che mostrano ciascuno un esempio di un tipo di estremità del DNA. Il primo mostra estremità tronche e il secondo estremità coesive. Il primo filamento di DNA ha la sequenza T, C, C, T sulla spina dorsale superiore, e la sequenza A, G, G, A sulla spina dorsale inferiore. Nell'esempio dell'estremità coesiva, il DNA è tagliato verticalmente per formare due pezzi. Ogni pezzo ha una coppia di basi T A e una coppia di basi C G. Il secondo filamento di DNA ha la sequenza G, A, A, T, T, C sulla spina dorsale superiore, e la sequenza C, T, T, A, A, G. Nell'esempio dell'estremità coesiva, il taglio inizia tra G e A sulla spina dorsale superiore, procede in verticale, poi procede orizzontalmente tra le quattro coppie di basi A T e T A, poi taglia in verticale per finire tra A e G sulla spina dorsale inferiore. Questo crea due pezzi. Un pezzo della spina dorsale superiore, A, A, T, T, e la coppia di basi C G finale. L'altro pezzo della coppia di basi G C iniziale e la spina dorsale inferiore, T, T, A, A.

Figura 1. Confronto fra estremità tronche del DNA con entrambi i filamenti della stessa lunghezza ed estremità coesive del DNA con un filamento più lungo dell'altro.

Il DNA con estremità coesive si lega facilmente ad altro DNA che ha estremità coesive complementari. Per impedire che il DNA con queste estremità coesive si accoppi con altro DNA, abbiamo bisogno di modificarle in estremità tronche (vedi Figura 1). Uno dei passaggi nella preparazione del campione NGS consiste nel riparare queste estremità coesive e creare DNA con estremità tronche. Questo è importante per il passo successivo, l'estremità sporgente di A.

Vedi anche: enzimi di riparazione delle estremità.