Coniugati enzimatici

La coniugazione di un enzima ad un anticorpo comporta la formazione di legami covalenti stabili. Alcuni esempi degli enzimi sono: perossidasi di rafano (HRP), ureasi e fosfatasi alcalina (AP). Gli anticorpi sono monoclonali o policlonali.

In ELISA, l'anticorpo coniugato all'enzima può essere un anticorpo primario o secondario, a seconda del tipo di ELISA eseguito. In entrambi i casi, l'enzima amplifica il segnale: più coniugati enzimatici si legano nel pozzetto, più velocemente appaiono i prodotti; meno coniugati enzimatici si legano nel pozzetto, più lentamente si formano i prodotti. Nel caso di prodotti cromogeni, al raggiungimento dell'intensità di colore desiderata, viene misurata direttamente l'assorbanza del prodotto. In alcuni casi, viene utilizzato un soluzione di stop per creare un punto finale fisso nel dosaggio.