Ordinamento elettrostatico delle cellule

L'ordinamento cellulare elettrostatico FACS dipende dalle caratteristiche delle cellule rilevate nel punto di interrogazione. È importante impostare una tensione adeguata per il forward e side scatter. Impostando la tensione, si centrano le celle in modo che i loro segnali siano misurabili. Inoltre, si configura una soglia per evitare di avere falsi segnali, per esempio di polvere, nei dati raccolti. Dopo l'interrogazione, il flusso viene suddiviso in goccioline di dimensioni identiche che vengono generate ad un ritmo estremamente veloce, stabile e prevedibile, applicando un'onda acustica nella camera di flusso.

Quando viene rilevata una cellula bersaglio, viene applicata una carica all'intero flusso collegato piuttosto che alle singole goccioline. Poi il flusso si rompe, formando le goccioline nel cosiddetto punto di break-off delle goccioline.

Tutte le goccioline, cariche o meno, passano poi attraverso un campo elettrico che viene generato dalle piastre di deflessione. Le cellule caricate vengono attirate verso le piastre, lontano dalle cellule non caricate, e cadono in tubi di raccolta, formando flussi laterali, mentre le cellule non caricate finiscono nei rifiuti (Figura 1).

Figura 1. Ordinamento elettrostatico FACS.